流式點(diǎn)陣儀的分類
流式點(diǎn)陣儀按照激發(fā)光源的類型可分為激光流式點(diǎn)陣儀和燈管流式點(diǎn)陣儀。
按照探測(cè)方式可分為前散射、側(cè)散射和熒光三種。
按照參數(shù)測(cè)定的可分為單參數(shù)、雙參數(shù)和多參數(shù)。其中單參數(shù)只測(cè)量一個(gè)參數(shù),如細(xì)胞大?。浑p參數(shù)可同時(shí)測(cè)量兩個(gè)參數(shù),如大小和復(fù)雜度;多參數(shù)可以同時(shí)測(cè)量三個(gè)或以上的參數(shù),如大小、復(fù)雜度和細(xì)胞表面分子的表達(dá)。
還有一些特殊的流式點(diǎn)陣儀,如時(shí)間飛行質(zhì)譜儀(TOF-MS)和打孔式流式點(diǎn)陣儀等。
流式點(diǎn)陣儀的作用用途
流式點(diǎn)陣儀生化實(shí)驗(yàn)儀器,可以對(duì)單個(gè)生物細(xì)胞進(jìn)行分析和測(cè)定。它的作用和用途如下:
1. 定量分析:可以對(duì)樣品中的特定成分進(jìn)行定量分析,例如檢測(cè)血液中白細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞的濃度。
2. 分選篩選:可以通過細(xì)胞表面標(biāo)記分選篩選出具有特定生物學(xué)特性的細(xì)胞亞群進(jìn)行后續(xù)的研究。
3. 單細(xì)胞分析:可以對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行復(fù)雜的檢測(cè)和分析,例如測(cè)定單細(xì)胞的基因表達(dá)譜、代謝物水平、蛋白質(zhì)組成和功能等。
4. 研究細(xì)胞動(dòng)態(tài):可以通過對(duì)大量細(xì)胞的連續(xù)監(jiān)測(cè)和跟蹤,研究細(xì)胞的生長、分裂和死亡等動(dòng)態(tài)過程。
5. 控制細(xì)胞實(shí)驗(yàn)條件:通過在流式點(diǎn)陣儀中控制光源、溫度和流速等參數(shù),可以為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)提供一個(gè)穩(wěn)定的環(huán)境和條件。
流式點(diǎn)陣儀的使用方法
1. 準(zhǔn)備流式細(xì)胞懸液:將細(xì)胞懸液經(jīng)過離心收集細(xì)胞,再用生理鹽水或PBS等溶液洗滌細(xì)胞,使細(xì)胞濃度適宜(一般在1×10^6 ~?。薄粒保埃蓿?jìng)€(gè)/mL之間),并加入染色劑(如PI、FITC等)或抗體等,混合均勻。
2. 調(diào)試儀器:打開流式點(diǎn)陣儀電源,啟動(dòng)軟件,進(jìn)行設(shè)備校準(zhǔn)、光源校準(zhǔn)等工作。
3. 標(biāo)定:將標(biāo)準(zhǔn)顆粒懸浮液放入樣品管中,進(jìn)行儀器的標(biāo)定,得到標(biāo)準(zhǔn)值。
4. 開始檢測(cè):取少量細(xì)胞懸液加入樣品管,使樣品均勻。打開激光光源,調(diào)節(jié)合適的流速,將樣品連續(xù)流動(dòng)進(jìn)入檢測(cè)室。儀器通過激光和光電多道檢測(cè)器對(duì)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度、散射光等進(jìn)行分析,得到細(xì)胞數(shù)量和熒光表達(dá)程度等信息。
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