血細(xì)胞分析儀是醫(yī)院進(jìn)行血常規(guī)檢查的必備機(jī)器,不僅在世界各地,而且在我國各級醫(yī)院都得到了普及應(yīng)用。它不但提高了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,還提供了許多實驗指標(biāo),對疾病的診斷和鑒別診斷起了重要的作用。本文就簡單地談?wù)勱P(guān)于血細(xì)胞分析儀的幾個問題?!?/p>
一.發(fā)展簡史
?。保梗矗纺昝绹茖W(xué)家?guī)鞝柼兀ǎ祝龋茫铮酰欤簦澹颍┌l(fā)明了用電阻法計數(shù)粒子的專li技術(shù)。1956年他又將這一技術(shù)應(yīng)用于血細(xì)胞計數(shù)獲得成功,其原理是根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)的性質(zhì),以電解質(zhì)溶液中懸浮血細(xì)胞在通過計數(shù)小孔時引起的電阻變化進(jìn)行檢測為基礎(chǔ),進(jìn)行血細(xì)胞計數(shù)和體積測定,這種方法稱為電阻法或庫爾特原理。1962年,我國第一臺血細(xì)胞計數(shù)儀在上海研制成功。到了60年代未血細(xì)胞分析儀除可進(jìn)行血細(xì)胞計數(shù)外,還可以同時測定HGB血紅蛋白。70年代,血小板計數(shù)儀問世。80年代,開發(fā)了白細(xì)胞分類(3分類及5分類)。90年代,開發(fā)出了可對網(wǎng)狀紅細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)的血細(xì)胞分析儀,同時5分類及幼稚細(xì)胞檢測更成熟,并發(fā)展成為血細(xì)胞分析流水線。
二.如何選購血細(xì)胞分析儀
當(dāng)前,在我國境內(nèi)銷售的的血細(xì)胞分析儀品牌很多,給醫(yī)院的選購造成了一定的麻煩。如日本SYSMEX公司(東亞醫(yī)用電子株式會社)的血細(xì)胞分析儀系列、美國庫爾特公司(現(xiàn)已被貝克曼收購)的血細(xì)胞分析儀系列、日本光電公司的血細(xì)胞分析儀系列、美國丹能公司以及瑞典博爾醫(yī)療公司的血細(xì)胞分析儀系列,還有國產(chǎn)的血細(xì)胞分析儀系列。因此建議醫(yī)院購買時從以下幾個角度考慮:
?。保畬嵱眯浴at(yī)院應(yīng)該根據(jù)自身的能力和標(biāo)本量來決定購買何種檔次的機(jī)器,不要盲目攀比,爭相購買高檔機(jī)器,從而造成儀器購置的浪費(fèi)?!?/p>
2.儀器性能。這是最關(guān)鍵的一個因素。不能完全相信廠家的宣傳,要多聽取專家意見和到友鄰單位了解?!?/p>
3.價格比。衡量同檔次機(jī)器的價格。
?。矗酆蠓?wù)。俗話說:救人如救火。對機(jī)器也是一樣,機(jī)器損壞待修時間過長會造成病人對醫(yī)院的信譽(yù)度下降,久而久之就會造成病人的流失。所以,機(jī)器的售后服務(wù)也是一個必須考慮的因素。
?。担o助設(shè)備、試劑、消耗品和零配件價格。
三.如何驗收血細(xì)胞分析儀
1.驗收前準(zhǔn)備工作:仔細(xì)閱讀說明書;按說明書要求準(zhǔn)備儀器的工作環(huán)境和相關(guān)的外部設(shè)備;成立驗收小組;擬定驗收計劃?!?/p>
?。玻_箱:必要時請商檢局派人參加;開箱后按照裝箱單清點(diǎn)物品是否和裝箱單一致。
?。常惭b:應(yīng)該對安裝過程進(jìn)行詳細(xì)的記錄?!?/p>
4.驗收儀器的技術(shù)性能指標(biāo)
?。ǎ保y定儀器試劑的本底;
(2)檢測儀器的精密度:用高、中、低值新鮮血標(biāo)本各測10次,計算X-S、CV值,取20~30個標(biāo)本隨機(jī)排列,各測3次,求出總重復(fù)性CV%,它代表批內(nèi)精度、儀器穩(wěn)定性、互染等因素的總和;
?。ǎ常┗ト韭剩喝「?、低兩個濃度全血(高、低值相差4~5倍),先測定高濃度3次,接著測低濃度3次,再測高濃度3次,計算高對低、低對高的互染率;
?。ǎ矗┚€性:取全血標(biāo)本,用鹽水稀釋相當(dāng)于全血的90%、80%、70%……,測得RBC、WBC、HGB結(jié)果做y=a+bx,a接近于0,b接近于1;
?。ǎ担┬?zhǔn):應(yīng)由廠家提供全血校準(zhǔn)物(低檔儀器用校準(zhǔn)顆粒及HGB校準(zhǔn)液)進(jìn)行校準(zhǔn);
?。ǎ叮┥鲜鲋笜?biāo)必須符合該儀器的出廠指標(biāo),才算驗收合格。由驗收小組成員、安裝工程師及設(shè)備科同志簽字后存檔?!?/p>
四.如何對血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)
儀器經(jīng)使用一個階段后應(yīng)該作一次全面的校準(zhǔn),因為儀器本身是個比較器。一旦儀器產(chǎn)生漂移將帶來分析誤差及不精密度,所以儀器應(yīng)該經(jīng)常定期校準(zhǔn)。
?。保畠x器校準(zhǔn)前準(zhǔn)備:徹底清洗管道,去除管道中的殘留血液、吸附的蛋白和纖維等,然后測定試劑空白,本底必須符合要求。
2.校準(zhǔn)物準(zhǔn)備:檢查校準(zhǔn)物是否在有效期內(nèi),外觀有無變質(zhì)。從冰箱中取出后,必須平衡至室溫,輕輕混勻,小心打開瓶蓋,勿使血液濺出,分裝成兩瓶?!?/p>
3.在儀器上測定校準(zhǔn)物,連續(xù)測定11次。第1次結(jié)果棄置不用,將2至11次結(jié)果計算出XS,絕對誤差,相對誤差?!?/p>
4.核對實測結(jié)果與校準(zhǔn)物所示結(jié)果,檢查實測結(jié)果有無升高或下降的趨向性?!?/p>
?。担袛嘈?zhǔn)結(jié)果:校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)要求如下表1。(1)如果各參數(shù)的絕對值誤差和相對誤差小于一級要求,屬合格范圍,不須作任何校準(zhǔn)。(2)如果參數(shù)大于一級要求,小于二級要求,可按說明書要求調(diào)整系數(shù)。當(dāng)調(diào)整后,可再測定另一瓶全血標(biāo)準(zhǔn)物,理應(yīng)達(dá)到小于一級要求水平。(3)如果結(jié)果大于二級要求,則需通知廠家派工程師修理或調(diào)整,為保證病人標(biāo)本測試質(zhì)量,該儀器應(yīng)暫停使用?!?/p>
表1校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)要求
絕對誤差相對誤差
一級要求二級要求
?。祝拢谩 。埃薄粒保埃梗欤埃础粒保埃梗欤保玻担ィ担ァ?/p>
?。遥拢谩 。埃埃场粒保埃保玻欤埃埃浮粒保埃保玻欤埃罚ィ福埃ァ?/p>
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?。校蹋浴 。叮啊粒保埃梗欤玻埃啊粒保埃梗欤玻罚ィ梗埃ァ?/p>
MPV ?。埃担埃妫欤福埃妫欤担ィ玻埃ァ?/p>
五.使用血細(xì)胞分析儀的注意事項
為了保證使用血細(xì)胞分析儀得出的結(jié)果能夠盡量反映病人的真實情況,在使用時必須注意以下幾方面:
1.血樣:由于靜脈血受外界因素影響較小,成份比較穩(wěn)定,檢測結(jié)果準(zhǔn)確度高重復(fù)性好,因此除嬰兒外,建議取血者均應(yīng)采用靜脈血。如果采集未梢血時,注意不可局部過度擠壓,避免血液中混入大量的組織液,而且易激活凝血系統(tǒng)產(chǎn)生局部凝血,導(dǎo)致檢測結(jié)果的誤差;第一滴血由于細(xì)胞成分不穩(wěn)定應(yīng)棄掉,用第二滴血進(jìn)行檢測?!?/p>
2.抗凝:使用拘櫞酸鹽抗凝劑時間過長易結(jié)晶,細(xì)胞形態(tài)易發(fā)生變化,影響計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性;草酸鹽易使血小板產(chǎn)生凝集,并可使白細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,影響計數(shù)結(jié)果及分類;而肝素抗凝過量易引起白細(xì)胞凝集和血小板減少;EDTA-2Na較EDTA-2K的可溶性低,血小板凝集的可能性大。因此國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(ICSH)1993年發(fā)表的文件中建議使用EDTA-2K作為血細(xì)胞分析儀的抗凝劑,用量為1.5~2.2mg/ml血?!?/p>
3.采血后用塞子密閉,室溫保存不超過6小時?!?/p>
4.稀釋:稀釋器、吸樣管要經(jīng)過校準(zhǔn)。吸血后吸樣管外的血液要完全擦干凈。血液稀釋后要盡快測定,否則易引起“稀釋性溶血”。
?。担靹颍簷z測前混勻很重要,如果無旋轉(zhuǎn)式混勻器應(yīng)顛倒混勻至少8次。
?。叮噭貉?xì)胞分析儀對試劑的要求非常嚴(yán)格,要求有嚴(yán)格的滲透壓標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定的導(dǎo)電率、高標(biāo)準(zhǔn)的純凈度以及對儀器管道和閥路無腐蝕作用。因此溶血劑、稀釋液及清洗劑等最好選用原廠配套產(chǎn)品。
?。罚准?xì)胞分類:首先必須明確,迄今為止,世界上無論多先進(jìn)的血細(xì)胞分析儀,進(jìn)行的白細(xì)胞分類都只是一種過篩手段,并不能完全取代人工鏡檢分類。要堅決糾正有些單位用了血細(xì)胞分析儀就丟掉鏡檢的錯誤思想?!?/p>
?。福|(zhì)量控制:血液分析必須建立嚴(yán)格的質(zhì)量控制制度,才能保證結(jié)果的可靠性。
六.現(xiàn)代血細(xì)胞分析儀的主要進(jìn)展
隨著高科技的引用和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,各種先進(jìn)的血細(xì)胞分析測試技術(shù)被應(yīng)用到血細(xì)胞分析儀上。1987年Coulter公司發(fā)明的VCS(Volume,V,體積;Conductivity,C,電導(dǎo)性;Scatter,S,光散射)技術(shù)可使血細(xì)胞未經(jīng)任何處理,在與體內(nèi)形態(tài)完全相同的自然狀態(tài)下得出檢測結(jié)果。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血細(xì)胞分析儀中采用了阻抗和射頻技術(shù)聯(lián)合的白細(xì)胞分類法。進(jìn)入90年代后,儀器的自動化程度增高(達(dá)到120份/小時);可進(jìn)行多參數(shù)分析(高達(dá)30余項);精密度高(重復(fù)計數(shù);保證微孔管清潔;取中段血;運(yùn)動流式細(xì)胞計數(shù)原理;鞘流原理……);向5分類及鑒別幼稚細(xì)胞發(fā)展;準(zhǔn)確度好,全面質(zhì)量管理,保證儀器檢測可靠性;具有智能化,可對同一病人診斷的前后進(jìn)行對比,提出綜合意見,確定診斷方向;更加注意保護(hù)操作人員的安全(SLS-Hb、自動混勻、進(jìn)樣、吸樣針內(nèi)外清洗等);向流水線發(fā)展,將血細(xì)胞分析儀、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)儀、推片、染色機(jī)聯(lián)成流水操作線。
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